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氨基酸检测?

你若是问蛋白质,我可以直接告诉你又双缩脲试剂(中学阶段),但氨基酸的检验比蛋白质麻烦多了.一、氨基酸的分离和检测氨基酸的分离和检测手段,以往用化学分析法、层析法、比色法、气相色谱法、氨基酸自动分析仪.随着高效液相色谱及填料的发展,HPLC在氨基酸检测方面显示了其特有的优越性.但大多数氨基酸无紫外吸收和荧光发射特性,为提高分析检测灵敏度和分离选择特性,通常将氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法与柱后衍生法.HPLC与各种衍生相结合的氨基酸分析技术,构成了具有广泛适用性的现代氨基酸分析技术.x0d二、鉴定是哪种氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法.1、茚三酮反应 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸环境加热) 紫色(脯氨酸、羟脯氨酸为黄色) (检验α-氨基)x0d2、坂口反应 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸x0dα-萘酚+碱性次溴酸钠 红色 (检验胍基 精氨酸有此反应)x0d3、米隆反应(又称米伦氏反应) HgNO3+HNO3+热 红色 (检验酚基 酪氨酸有此反应,未加热则为白色)x0d4、Folin-Ciocalteau反应(酚试剂反应) 磷钨酸-磷钳酸 蓝色 (检验酚基 酪氨酸有此反应)x0d5、黄蛋白反应 浓硝酸煮沸 黄色 (检验苯环 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反应)x0d6、Hopkin-Cole反应(乙醛酸反应) 加入乙醛酸混合后徐徐加入浓硫酸 乙醛与浓硫酸接触面处产生紫红色环 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)x0d7、Ehrlich反应 P-二甲氨基苯甲醛+浓盐酸 蓝色 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)x0d8、硝普盐试验 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应)

检验氨基酸用什么方法?

1.茚三酮反应,氨基酸与其发生反应缩合成蓝色物质。除开脯氨酸和羟脯氨酸,他们与其反应生成黄色衍生物。

2.桑格反应,氨基酸与其反应会生成黄色的2,4-二硝基氨基酸,可以用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。

3.艾德曼反应(DNFB反应),即氨基酸与苯异硫氰酸反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸。

测定氨基酸含量的方法有几种

1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.

2)比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点:比较准确.

3)测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.

4)血球计数板法.优点:简便、快速、直观.缺点:结果包括死菌和活菌.

5)液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点:可计算活菌数,较准确.缺点:比较繁琐.

6)平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.缺点:操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.

果蔬氨基酸测定方法(苹果中氨基酸的测定)

氨基酸的检测方法有哪些

1. 分光光度法氨基酸检测:主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生剂为茚三酮。

2. 毛细管电泳法氨基酸检测:根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。

3. 近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。

4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。

5. 高效液相色谱法氨基酸检测:是最常用的一种氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。

国标 氨基酸的检测方法

国家标准检测食品中的氨基酸是采用先将食品中蛋白质经盐酸水解成为游离氛基酸,经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后,与印三酮溶液产生颜色反应,再通过分光光度计比色浏定氨基酸含量。

氨基氮测定法?

5.20.1

原理:氨基酸为两性电解质。在接近中性的水溶液中,全部解离为双极离子。当甲醛溶液加入后,与中性的氨基酸中的非解离型氨基反应,生成单羟甲基和二羟甲基诱导体。此反应完全定量进行。此时放出氢离子可用标准碱液滴定。根据碱液的消耗量,计算出氨基态氮的含量。5.20.2

试剂:所用试剂均为分析纯,使用的水为蒸馏水或同等纯度的水。5.20.2.1

0.1MOL/L

氢氧化钠标准溶液:按GB601配制与标定。5.20.2.2

0.05MOL/L

氢氧化钠标准滴定溶液:用0.1MOL/L的氢氧化钠标准溶液当天稀释。5.20.2.3

中性甲醛溶液:量取200ML甲醛溶液(GB685)于400ML烧杯中,置于电磁搅拌器上,边搅拌边用0.05MOL/L氢氧化钠溶液调至PH8.1。5.20.2.4

30%过氧化氢(HG3-1082)5.20.2.5

PH7.00、4.01缓冲溶液。5.20.3

仪器设备:实验室常用玻璃仪器及下列各项:5.20.3.1

PH计:直接读数,测量范围0-14PH,精度±0.1PH。5.20.3.2

电磁搅拌器。5.20.3.3

玻璃电极5.20.4

试样的制备:5.20.4.1

浓缩果蔬汁在浓缩果蔬汁中,加入与在浓缩过程中失去的天然水分等量的水,使其成为果汁,并充分混匀,供测试用。5.20.4.2

果蔬原汁及果蔬汁饮料将试样充分混匀,直接测定。5.20.5

测定步骤:5.20.5.1

PH计校正:按W-PBB-4303中“PH值测定作业规范”校正步骤校正。5.20.5.2

吸取试样M克(毫升)(氨基态氮的含量为1-5毫克)于烧杯中,加5滴30%过氧化氢,将烧杯置于电磁搅拌器上,电极插入烧杯内试样中适当位置。如需要加适量蒸馏水。5.20.5.3

开动电磁搅拌器,先用0.1MOL/L氢氧化钠溶液慢慢中和试样中的有机酸。当PH达到7.5左右时,再用0.05MOL/L氢氧化钠溶液调至PH8.1,并保持1分钟不变。然后慢慢加入10-15ML中性甲醛溶液。1分钟后用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至PH8.1。记录消耗0.05MOL/L氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数。5.20.6

结果表示:测定结果表示见公式:

X=

X:每100克(或100毫升)试样中氨基态氮的毫克数,(mg/100g或mg/100ml)C:氢氧化钠标准滴定溶液的浓度,MOL/LV:加入中性甲醛溶液后,滴定试样消耗0.05MOL/L氢氧化钠标准滴定溶液的体积,MLM:试样的重量,G(或体积ML)K:稀释倍数14:1ML1N氢氧化钠标准滴定溶液相当于氮的毫克数同一样品以两次测定结果的算术平均值作为结果,精确到小数点后第一位。

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